domingo, 23 de febrero de 2025

Medimos el contenido en pigmentos fotosintéticos en los pimientos

El pasado viernes tuvimos nueva sesión del proyecto, en este caso dedicada a valorar la cantidad de clorofila a, clorofila b y carotenos en nuestros pimientos. El jueves preparamos los extractos triturando 0,6 gramos de pimiento en 12 ml de etanol; las muestras se dejaron macerando en el frigorífico y al día siguiente se procedió centrifugar los extractos a 5000 rpm durante 5 minutos y se estudió la absorbancia con la ayuda del espectrofotómetro. Las medidas se hicieron a 470 nm, a 649 nm y a 665 nm. En algunos casos fue necesario diluir el extracto pues la concentración era demasiado elevada para la sensibilidad del instrumento. La tabla muestra las lecturas y las diluciones a las que se hicieron. Para cada pimiento se tomaron tres medidas, a las que se hallará el valor medio que será utilizado para los cálculos con las ecuaciones de Pompelli.

 
¿Os atrevéis a hacer los cálculos? Es fácil; es solo cuestión de aplicar las ecuaciones y las diluciones. Puesto que matemáticamente las ecuaciones son lineales, podemos suponer que la absorbancia -en el caso de que se haya hecho dilución-  es el valor observado multiplicado por el factor de dilución. Tened en cuenta que para el pimiento riojano entreverado tratado con agua, todas las medidas se han hecho diluyendo a 1/4 (incluidas los valores de absorbancia a 649 nm y a 665 nm). Esto se ha debido a que he tuve que repetir las medidas por un error en la dilución).


miércoles, 19 de febrero de 2025

Pasamos las plántulas de las placas de cultivo a macetas

Esta mañana hemos tenido una nueva sesión del proyecto con nuestros investigadores. Tras varias semanas con las plántulas de pimiento creciendo en placa ha llegado el momento de pasarlas a maceta para que continúen el desarrollo. Lo hemos hecho solo para los pimientos picantes porque en los dulces va muy lento del desarrollo de las plántulas. 

Teníamos dos lotes iniciales de pimientos picantes, uno control -tratado con agua- y otro en el que las semillas habían sido tratadas con melatonina. Las plantas de cada uno de estos se han dividido en dos, uno que será tratado con agua mientras que la otra mitad se tratará más adelante con melatonina. Por tanto, tendremos:

- 1 lote de plantas control tratadas inicialmente con agua y posteriormente también con agua. 
- 1 lote de plantas control tratadas inicialmente con agua y que serán tratadas posteriormente con melatonina. 
- 1 lote de plantas tratadas inicialmente con melatonina y tratadas con agua posteriormente. 
- 1 lote de plantas tratadas inicialmente con metalonina y que volverán a ser tratadas más adelante con este compuesto.

 Se ha procedido a abrir las placas y a extraer con mucho cuidado las plántulas, se han puesto en agua y posteriormente se han transferido a macetas con sustrato y vermiculita, previamente regadas. Cada maceta se ha etiquetado en función de sus tratamientos. Posteriormente se han colocado en unos dispositivos que semejan invernaderos a pequeña escala donde se desarrollarán las plantas. Se mantendrán a temperatura ambiente y con iluminación natural.

Las siguiente fotos ilustran el proceso:



 
 
 
 
 
  



martes, 18 de febrero de 2025

Determinación de vitamina C. Volúmenes de lugol añadidos.

El pasado viernes iniciamos los experimentos para determinar el contenido de vitamina C (ácido ascórbico) de nuestros pimientos. Nos dio tiempo a preparar los extractos en un medio con tampón TRIS-ClH y a titular con el lugar a seis de ellos.  Los seis restantes se congelaron y se valoraron el pasado lunes. A continuación se muestra la tabla con las cantidades de lugol añadidas:

A partir de los valores medios y aplicando la curva patrón que en su momento preparamos es momento de calcular las concentraciones de vitamina C en nuestros pimientos. No olvidéis, a efectos de cálculos, que hemos hecho la determinación en volúmenes de 0,5 ml de extracto de pimientos.
Es ahora momento de valorar estos resultados y de ver si hay diferencias en el contenido de ácido ascórbico entre pimientos entreverados y maduros, o entre los tratados con agua y con melatonina. Aunque hay un dato que como hemos comentado en clase nos ha sorprendido y parece fuera de toda lógica y es el valor tan alto, comparado con los otros estados y tratamientos que tienen los pimientos yellow maduros tratados con agua. 
Me gustaría hacer algunas puntualizaciones que podrían resultar útiles para la interpretación de los resultados. La primera es que, a diferencias con otros proyectos de años anteriores en los que trabajábamos con solo un pimiento por experimento, en este caso tenemos mezclados trozos de varios pimientos (al menos en las variedades de las que teníamos más ejemplares); en segundo lugar que el estado de los pimientos era muy diferente según la variedad, de modo que el que más se deterioró fue el yellow; cuando los procesé hube de retirar algunos trozos porque estaban muy alterados.  Y como siempre, no olvidéis hacer vuestros análisis en forma de comentarios.


domingo, 16 de febrero de 2025

El estado de nuestras plántulas el 14 de febrero de 2025

Tras recibir las imágenes con el estado de las plantas en la Estación Experimental del Zaidín, mostramos aquí las fotos de las nuestras el día 14 de febrero.














El estado de las plántulas en la EEZ

Como recordaréis, se hicieron dos lotes de cultivos en placa con los pimientos dulces y picantes. Uno de ellos se llevó a la Estación Experimental del Zaidín y el estado de las plántulas es el que muestran las imágenes siguientes, enviadas por Marichu Campos.











miércoles, 12 de febrero de 2025

pH y Brix de nuestros pimientos

Esta mañana hemos procedido a hacer las primeras determinaciones bioquímicas de nuestros pimientos: el pH y el contenido de azúcares solubles, medido como grados Brix con un difractómetro. Hemos tomado nuestras muestras (estaban en el congelador) y hemos obtenido su jugo triturando y filtrando los trozos de pimiento a través de una tela de nylon con la ayuda de una jeringa. El hecho de que las muestras estuviesen congeladas ha facilitado la extracción al jugo pues ha sido más fácil triturarlas que si hubiesen estado frescas.


 


 

El pH se ha medido mediante tiras indicadoras de pH, mientras que el contenido en azúcares solubles se ha valorado mediante un difractómetro. Los valores obtenidos se muestran a continuación.


 


lunes, 10 de febrero de 2025

Así se van desarrollando nuestras plántulas de pimientos

Casi dos semanas después de que sembráramos las semillas de pimientos en las placas ya tenemos resultados. Lo más llamativo hasta ahora ha sido que no ha germinado ninguna de las semillas de pimientos dulces; por el contrario, lo han hecho las de pimientos picantes. Como se puede ver en éstas, el grado de desarrollo de las plántulas es muy desigual; el crecimiento de las raíces es muy heterogéneo, con plántulas con raíces incipientes y otras muy desarrolladas. Lo mismo se puede decir de la aparición de los cotiledones.

¿Se aprecian diferencias en el desarrollo de las plántulas entre los controles y las tratadas con melatonina? Esperamos vuestras opiniones en los comentarios.

EEZ Control 1

EEZ Control 2

EEZ Control 3

ZV Control 1

ZV Control 2

ZV Control 3


EEZ Melatonina 1

EEZ Melatonina 2

EEZ Melatonina 3

ZV Melatonina 1

ZV Melatonina 2

ZV Melatonina 3

lunes, 3 de febrero de 2025

¿Cuánto peso han perdido nuestros pimientos?

En paralelo al experimento que hemos desarrollado para ver si la melatonina afecta a la maduración de los frutos a través de los cambios que mostraban, hemos valorado la pérdida de peso a lo largo de estos tres días. Esa pérdida se debe en su mayor parte a la pérdida de agua. Los resultados se muestran en la siguiente tabla:


 En la tabla se representan los pesos de los pimientos, en función de su estado de maduración y del tratamiento con agua o melatonina. En la última columna se muestran los porcentajes medios según los tratamientos y las variedades.

Y ahora es momento de analizar estos datos. ¿Hay diferencias en la pérdida de agua según el estado de maduración de los pimientos? ¿Y según los tratamientos?

 

Primeros resultados: Cómo han cambiado nuestros pimientos

 El primer experimento que hemos realizado con nuestros pimientos es visual. Se trata de observar los cambios que han experimentado los frutos a lo largo de tres días, en función del tratamiento con melatonina o el control con agua.

Los resultados se muestran en las imágenes de abajo, donde se incluyen fotos de las dos caras de los pimientos, tanto de los pimientos entreverados como de los maduros y al día siguiente de iniciar el experimento (día 1) y a los tres días del comienzo (día 3). El estado inicial de los pimientos se puede ver en la entrada anterior.

¿Qué cambios hemos observado en los pimientos, en general, a lo largo de estos tres días? ¿Se afectan por igual las variedades? ¿Observamos alguna diferencia entre los pimientos tratados con melatonina y los controles, pulverizados con agua destilada? Esperamos vuestros comentarios.

 

Pimientos peonza entreverados. Día 1.

Pimientos peonza entreverados. Día 3.

Pimientos peonza maduros. Día 1


Pimientos peonza maduros día 3.

Pimientos riojanos entreverados. Día 1

Pimientos entreverados riojanos. Día 3

Pimientos riojanos maduros. Día 1

Pimientos riojanos maduros. Día 3

Pimientos entreverados yellow. Día 1

Pimientos yellow entreverados. Día 3.

Pimientos yellow maduros. Día 1

Pimientos yellow maduros. Día 3.


Concentración de pigmentos en nuestros pimientos

En una entrada anterior publicábamos los valores de las lecturas en el espectrofotómetro de los extractos alcohólicos de los pimientos. A pa...